干擾素的可溶性原核表達(dá)優(yōu)化之躍進(jìn)培養(yǎng)箱應(yīng)用

    干擾素是 由 機(jī) 體 免 疫 細(xì) 胞 產(chǎn) 生的一種具有抗病毒、抗腫瘤 和 免 疫 調(diào) 節(jié) 等 多 種 生 物學(xué)活性的糖蛋白。根據(jù)干擾素的來(lái)源、生物學(xué) 性質(zhì)及活性，將干擾素分Ⅰ型和Ⅱ型。人們生活水平迅速提高，帶動(dòng)了寵物養(yǎng) 殖業(yè)的蓬勃發(fā)展，與貓有關(guān)的疾病特別是病毒性疾 病逐年增多。本研究首先對(duì)貓 ω干擾素（ＦｅＩＦＮ－ω） 和貓 γ干 擾 素 的基因完成 克 隆，然 后 插 入 原 核 表 達(dá) 載 體 ｐＥＴ２８ａ－ ＳＵＭＯ 構(gòu)建重組質(zhì)粒并摸索最佳誘導(dǎo)表達(dá)條件，最 終以可溶性形式表達(dá)并純化出２種融合蛋白。高速臺(tái)式空冷型離心機(jī)，上海 博翎儀器設(shè)備有限公司產(chǎn)品；制冰機(jī)，常熟市雪科電 器有限公司產(chǎn)品；全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀，上海閃譜生物科技 有限公司產(chǎn)品；梯度基因擴(kuò)增儀，上海奧陸生物科技 有限公司 產(chǎn) 品；紫 外 風(fēng) 光 光 度 計(jì)，美 國(guó) ＧＥ 公 司 產(chǎn) 品；電熱恒溫培養(yǎng)箱，上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司產(chǎn)品。

    干擾素作為機(jī)體重要的防疫系統(tǒng)成員能夠?qū)? 病毒感染，防止病毒在體內(nèi)快速擴(kuò)散，而體外表達(dá)的 干擾 素 與 天 然 干 擾 素 具 有 高 度 相 似 的 生 物 學(xué) 活 性。在大腸埃希氏菌中主要以不可溶的包 涵體形式表達(dá)。ＩＦＮ－γ作為新的基因產(chǎn)品，其優(yōu)點(diǎn) 是毒性小、抗原性弱并可多次利用，在抗腫瘤細(xì)胞增 殖和免疫調(diào)節(jié)方面發(fā)揮主要作用，而將ＩＦＮ－γ作為 佐劑給動(dòng)物免疫時(shí)，可以增強(qiáng)機(jī)體的抵抗能力，表明 ＩＦＮ－γ在作為治療制劑或疫苗佐劑使用時(shí)，能 夠 取 得良好效果，也有研究發(fā)現(xiàn)ＩＦＮ－γ能夠誘導(dǎo)Ⅰ型干 擾 素 的 表 達(dá)。